关于二氧化碳培养箱的维护消毒及日常维护(上)

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关于二氧化碳培养箱的日常维护消毒(上)
2022/11/9 11:40:11   文章来源:www.laibaomed.cn

二氧化碳培养箱消毒

二氧化碳培养箱中的微生物往往会对培养的结果产生一定的影响,常见的微生物处理方式包括物理过滤和灭菌,下面让我们一起来探讨两种方式。

1.1 物理过滤  将箱体内气体通过过滤器循环,使箱体内气体洁净度达到一定的级别(常见UPLA过滤器为1级、HEPA 过滤器为 100 级);主要作用是保持箱体内洁净度,保证培养箱体内的环境,但对微生物及病毒不起到任何的杀灭作用,仅仅是将箱体内的微生物过滤到过滤器内,这样需要对过滤器进行定期更换,采用物理过滤的培养箱更适合于环境条件较好的实验室。

1.2 灭菌  杀灭或清除传播媒介上的所有微生物(包括芽胞),使之达到无菌程度。经过灭菌的物品称“无菌物品”,培养箱内的无菌处理是指杀灭所谓微生物、病毒等,彻底避免环境对样本的影响,以及消除不同样本之间的交叉污染。根据不同的去除对象以及应用环境需求,采用有效的方法。

1.2.1 微生物分类

根据微生物的抵抗能力不同,可将微生物分为如下几类:

① 细菌繁殖体  易被一般的消毒剂杀灭,一般革蓝氏阳性细菌对消毒剂较敏感,采用化学消毒效果较为明显;革蓝氏阴性杆菌则常有较强的抵抗力,一般的化学消毒效果不明显,但对热敏感,采用热力学方法效果明显。

② 细菌芽孢和真菌芽胞  有厚厚的孢子壁,对化学消毒剂有较强的抵抗力,一般的化学消毒对芽孢效力有限;消毒能力强的化学试剂对芽孢有一定的杀灭作用,但对浓度、处理方法等要求严格;常见的方法是采用热力学方法。

③ 病毒  种类较多,不同病毒种类对外界的抵抗能力不同,化学试剂消毒的效果也不相同,RNA活性受温度影响明显,一般采用热力学方法去除。

④ 真菌  普遍对环境抵抗能力强,一般的紫外消毒方式和化学试剂消毒达不到预期的效果,通常采用热力学方法处理,煮沸或使用高压灭菌灯。


1.2.2 热力学灭菌方法

培养箱内常见的热力学灭菌方法包括干热灭菌和湿热灭菌。

①干热灭菌 将箱体内加热到120℃以上,湿度为20% 以内,持续一定的时间,通过高温使蛋白质及核酸变性失活,达到杀灭的目的。有些真菌芽孢,由于厚厚的细胞壁保护,能够抵抗一定的高温,灭菌不能彻底。

②湿热灭菌 在高温的同时保持箱体内饱和湿度,达到彻底灭菌效果。

湿热灭菌相比于干热灭菌,主要优点是:

①湿热灭菌中的菌体吸收水分,蛋白质含水量增高,所需凝固温度降低,易凝固变性;

②高温水蒸汽对蛋白质有极高的穿透力,从而加速蛋白质变性而迅速死亡;

③蒸汽有潜热存在,能迅速提高菌体的温度,从而增加灭菌效力。

由此可见,培养箱采用湿热灭菌是一种可行且效果极佳的灭菌方法,能彻底消灭细菌、真菌、孢子、病毒等微生物且没有二次污染。最好一个季度采用一次高温灭菌,消除潜在的污染风险。



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