移液器原理、使用、维护、校准鉴定（一）

微量加样器（移液器）最早出现于1956年，由德国生理化学研究所的科学家Schnitger发明，其后，在1958年德国Eppendorf公司开始生产按钮式微量加样器，成为世界上第一家生产微量加样器的公司。

这些微量加样器的吸液范围在1—1000~1之间，适用 于临床常规化学实验室使用。微量加样器发展到今天，不但加样更为精确，而且品种也多种多样，如微量分配器、多通道微量加样器等，其加样的物理学原理有下面两种：

①使用空气垫(又称活塞冲程)加样；

②使用无空气垫的活塞正移动(positive displacement)加样。

上述两种不同原理的微量加样器有其不同的特定应用范围。 

活塞冲程(空气垫)加样器可很方便地用于固定或可调体积液体的加样，加样体积的范围在小于1ul至l0ml之间。加样器中的空气垫的作用是将吸于塑料吸头内的液体样本与加样器内的活塞分隔开来，空气垫通过加样器活塞的弹簧样运动而移动，进而带动吸头中的液体，死体积和移液吸头中高度的增加决定了加样中这种空气垫的膨胀程度。

因此，活塞移动的体积必须比所希望吸取的体积要大约2％～4％，温度、气压和空气湿度的影响必须通过对空气垫加样器进行结构上的改良而降低，使得在正常情况下不至于影响加样的准确度。

一次性吸头是本加样系统的一个重要组成部分，其形状、材料特性及与加样器的吻合程度均对加样的准确度有很大的影响。 

以活塞正移动为原理的加样器和分配器与空气垫加样器所受物理因素的影响不同。

因此，在空气垫加样器难以应用的情况下，活塞正移动加样器可以应用，如具有高蒸汽压的、高黏稠度以及密度大于2．0g／cm3的液体；又如在临床聚合酶链反应(PCR)测定中，为防止气溶胶的产生，最好使用活塞正移动加样器。

活塞正移动加样器的吸头与空气垫加样器吸头有所不同，其内含一个可与加样器的活塞耦合的活塞，这种吸头一般由生产活塞正移动加样器的厂家配套生产，不能使用通常的吸头或不同厂家的吸头。 

多通道加样器、电子加样器和分配器的原理与上述相同。多通道加样器通常为8通道或12通道，与8X12＝96孔微孔板一致。

多通道加样器的使用不但可减少实验操作人员的加样操作次数，而且可提高加样的精密度。电子加样器和分配器为半自动加样系统，电子加样器最大的优点是其具有很高的加样重复性，应用范围广。

1．使用合适的吸头：
为确保更好的准确性和精度，建议移液量在吸头的35％-100％量程范围内。

2．设定移液体积
从大量程调节至小量程为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可
从小量程调节至大量程时，应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，这样可以保证移液器的精确度

3．吸头的安装：
对于大多数品牌的移液器，特别是多道移液器，安装吸头并非易事：为追求良好的密封性，将移液器垂直插入吸头，左右旋转半圈，上紧即可。也有人会用移液器反复撞击吸头来上紧，但这样操作会导致吸头变形而影响精度，严重的则会损坏移液器，所以应当避免出现这样的操作。有的多道移液器设有O型环，配合有前挡点的吸头，只需轻压一下即可达致理想密封。

4．吸头浸入角度和深度：
吸头浸入角度控制在倾斜20度之内，保持竖直为佳；吸头浸入深度建议如下所示：


5．吸头润洗：
对常温样品，吸头润洗有助于提高准确性；但是对于高温或低温样品，吸头润洗反而降低操作准确性，请使用者特别注意。

6．吸液速度：
移液操作应保持平顺、合适的吸液速度；过快的吸液速度容易造成样品进入套柄，带来活塞和密封圈的损伤以及样品的交叉污染。

7．移液器的放置
吸有液体的移液器不应平放，吸头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈

8．移液器在每次实验后应将刻度调至最大，让弹簧回复原型以延长移液器的使用寿命 

9．为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层”液膜”，造成排液量偏小而产生误差。

10．.浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。

11．移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体

12．不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度。同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作 

1、移液时保持正确的姿势；不要时刻紧握移液器，使用带指钩的移液器帮助缓解手部疲劳；有可能的话经常换手操作。 
2、定期检查移液器的密封状况，一旦发现密封老化或出现漏液，须及时更换密封圈。 
3、每年对移液器进行1-2次检验（视使用频率而定）。 
4、绝大多数移液器，在使用前和使用一段时间后，要给活塞涂上一层润滑油以保持密封性；

移液器的清洁
定期清洗移液器，可以用肥皂水、60 ％异丙醇、70%乙醇等非腐蚀性洗涤剂，再用蒸馏水清洗，自然晾干。高温消毒之前，要确保移液器能适应高温。

故障分析以及排除